04. Versuch: Fluoreszenzspektroskopie

Die Fluoreszenzspektroskopie ist eine der aktuellsten und vielseitigsten spektroskopischen Untersuchungsmethoden in der Biophysik. Sie unterscheidet sich von den meisten anderen spektroskopischen Methoden dadurch, daß die Emission und nicht die Absorption von Strahlung gemessen wird. Als Auswahl aus dem Spektrum verschiedener Anwendungsmöglichkeiten der Fluoreszenzspektroskopie auf biologische Systeme sollen Sie in diesem Praktikumsversuch drei Anwendungen der Technik auf das häufigste Protein des menschlichen Blutserums, Serumalbumin (HSA), kennenlernen. Das erste Anwendungsbeispiel beschäftigt sich mit der Analyse der Zugänglichkeit des Bausteins Tryptophan im HSA durch Fluoreszenzlöschung. Das zweite und dritte Beispiel betreffen den Nachweis der Bindung von kleinen Molekülen (Liganden) an HSA: von Flavonol durch Resonanz-Energieübertragung und von 8-Anilino-1-naphtalensulfonat (ANS) durch die Änderung der Quantenausbeute des Liganden beim Binden.

Betreuer

Versuchsanleitung (PDF)

Fragen zur Versuchsvorbereitung

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